黑色素瘤

① 945例初治晚期黑色素瘤患者1：1：1随机，纳武单抗与伊匹单抗联合，或单药，根据PD-L1表达、BRAF突变和晚期状态进行分层；② 至少随访36个月，联合组中位OS未达到，纳武单抗组为37.6个月，伊匹单抗组为19.9个月，联合组对伊匹的死亡风险HR0.55，纳武对伊匹的HR0.65，3年总体生存率分别为58%、52%和34%；③ 3或4度治疗相关性不良事件发生率分别为59%、21%和28%；④ 与伊匹单抗单药相比，联合治疗或纳武单抗单药治疗晚期黑色素瘤，OS明显改善。

黑色素瘤 BRAF突变免疫检查点抑制剂抗PD-1单抗抗CTLA-4单抗

黑色素瘤

PD-1抗体用于III-IV期恶性黑色瘤的辅助治疗：生存期大幅延长

① 906例15岁以上手术完全切除的IIIB、IIIC或IV期黑色素瘤患者，1：1随机分组，接受纳武单抗或伊匹单抗，持续治疗1年、疾病复发、不可耐受毒性或撤回知情同意；② 至少随访18个月，两组12个月的无复发生存率（RFS）分别为70.5%和60.8%，HR 0.65；③ 治疗相关的3或4度分别为14.AE4%和45.9%，AE导致的治疗终止分别为9.7%和42.6%；④ 与伊匹单抗相比，纳武单抗辅助治疗明显改善完全切除的IIIB、IIIC或IV期黑色素瘤患者的RFS，且3或4度AE发生率低。

黑色素瘤辅助治疗免疫检查点抑制剂抗PD-1单抗抗CTLA-4单抗

BRAF抑制剂

靶向治疗用于恶性黑色素瘤辅助治疗：登顶NEJM

① BRAF抑制剂达拉菲尼联合MEK抑制剂曲美替尼，改善晚期BRAF V600突变患者的生存期；② 870例完全切除的BRAF V600E或V600KIII期黑色素瘤患者，随机分组，口服150 mg每日二次达拉菲尼联合2mg每日一次曲美替尼或配对的安慰剂，共12个月；③ 中位随访2.8年，联合治疗组估算3年无复发生存率58%，安慰剂组为39%，3年总体生存率分别为86%和77%，联合治疗组无远处转移生存率和无复发生存率高于安慰剂组；④ 达拉菲尼联合曲美替尼的安全性同前。

BRAF抑制剂 MEK抑制剂黑色素瘤辅助治疗达拉菲尼

黑色素瘤

BRAF抑制剂耐药：MAPK抑制剂及免疫调控

① MAPKi治疗后残存的患者来源肿瘤的转录组与MAPKi诱导的人类黑色素瘤细胞株或免疫缺陷小鼠的哺乳类黑色素瘤的一过性转录组状态；② 残存肿瘤表现出高度周期性转录组改变，以及MAPKi选择性细胞株（提示肿瘤细胞固有的重组）或大部分小鼠肿瘤中的过程；③ 肿瘤细胞固有的重组削弱MAPK依赖性，增强间充质、血管新生及IFN-炎症特征和生长/生存对多RTKs和PD-L2的依赖性；④ CD11c+免疫细胞中PD-L2的上调驱动T细胞炎症的缺失并促进BRAFi耐药。

黑色素瘤 MAPKi耐药 BRAFi耐药转录组血管新生

18F-FDG PET肿瘤显像

PD-1抗体是否起效：用药后2周就知道！

① 本研究评估18F-FDG-PET是否对检测PD1疗法治疗后两周的中晚期转移性黑色素瘤患者全部响应；② 2014-2016年，10例患者接受三个时间点的18F-FDG-PET/MRI实验；③ 3例在t1期具部分代谢反应的的患者在t2期全部响应，在t2期，发现6例进展性代谢疾病（PMD），其中2例在t1期稳定性代谢疾病（SMD）；④ t2期PMD患者OS在148-814天之间， 1例t1期和t2期都为SMD，308天后肿瘤进展；⑤ 18F-FDG-PET检测可成为检测黑色素瘤的可靠方式，减少患者不必要的治疗。

18F-FDG PET肿瘤显像早期的疗效评价免疫疗法黑色素瘤 18F-FDG-PET

黑色素瘤

BRAF抑制剂耐药机制：NRAS同工酶2过表达

① BRAF耐药黑色素瘤细胞株及肿瘤患者组织中NRAS同功酶2上调，当BRAF突变黑色素瘤细胞株过表达同功酶2，在BRAFi处理时细胞增殖和体内肿瘤生长仍明显增加，在BRAFi耐药细胞株中shRNA处理基因敲除同功酶2，恢复对BRAFi的敏感性；② 同功酶2过表达的细胞MAPK通路下调，PI3K通路上调；③ 免疫沉淀同功酶2验证了该同功酶与PI3K 和BRAF/RAF1的结合亲和性；④ AKT抑制剂联合BRAFi，部分恢复高表达同功酶2细胞对BRAFi的敏感性。

黑色素瘤耐药威罗菲尼 BRAF NRAS

纳武单抗

PD-1抗体联合CTLA-4抗体，用于恶性黑色素瘤：安全性问题，要重视

① 纳武单抗联合伊匹单抗（nivo + ipi）是晚期黑色素瘤的标准治疗；② 64例晚期或不可手术黑色素瘤患者入组nivo + ipi扩大计划（EAP），nivo + ipi联合治疗最多4剂，后续nivo或派姆单抗维持治疗；③ 25例完成4剂nivo + ipi，31例未接受维持治疗，80%患者终止治疗的原因是毒性；④ 91%患者出现免疫相关AEs（irAEs），72%需全身性糖皮质激素治疗，25%糖皮质激素难治性irAEs需英夫利昔单抗或麦考酚酯治疗，50%患者急诊就诊，36%患者住院。

纳武单抗伊匹单抗黑色素瘤免疫相关不良事件 Matthieu Million

黑色素瘤

肿瘤浸润的免疫抑制性髓系细胞为何如此猖獗：Tet2在搞鬼！

① Tet2是一种DNA甲基胞嘧啶双加氧酶，在造血系统恶性肿瘤中作为肿瘤抑制因子；② 在黑色素瘤患者和小鼠模型中，Tet2在肿瘤内骨髓细胞中表达增加，该表达增加依赖于IL-1R-MyD88通路；③ 骨髓细胞中Tet2缺失会抑制黑色素瘤生长，并将肿瘤相关巨噬细胞中的免疫抑制基因表达程序转变为促炎症的程序，伴随着免疫抑制功能的降低；④ 并导致肿瘤中效应T细胞数量增加，而T细胞缺失消除了骨髓细胞中Tet2缺失导致的肿瘤生长抑制。

黑色素瘤 DNA甲基胞嘧啶双加氧酶效应T细胞 5hmC 5mC

黑色素瘤

BET抑制剂和ATR抑制剂联合：恶性黑色素瘤的克星

① 在Myc驱动的淋巴瘤中，通过与ATR抑制剂的联合治疗，可增强溴结构域和末端结构域（BET）家族的溴结构域蛋白的表观遗传抑制剂的功效；② 通过病人来源的异种移植和移植了B16F10黑素瘤细胞的B6小鼠，评估联合治疗的疗效；③ 在培养的黑色素瘤细胞中联合抑制BET蛋白和ATR，显示出与淋巴瘤中类似的效果，如诱导凋亡和p62,涉及自噬、衰老相关分泌通路和内质网应激；④ 病人来源的异种移植和B16F10细胞的小鼠体内也观察到皮下肿瘤凋亡和生长抑制。

黑色素瘤溴结构域和末端结构域（BET） ATR抑制剂 BET溴结构域抑制剂

CRISPR-Cas9基因工程

当crispr遇到肿瘤免疫治疗：Nature告诉你会发生什么！

① 开发了包含T细胞作为效应器和黑色素瘤细胞作为靶点的“二类细胞”（2CT）-CRISPR方法；② 干扰CD8+ T细胞效应器功能的肿瘤细胞内缺失的基因，在抗原提呈和干扰素-γ信号传导过程中起作用，与肿瘤基因组图谱中患者的细胞溶解活性相关；③ 在免疫治疗耐药的肿瘤中，鉴定出编码apelin受体APLNR的多个功能缺失性突变；④ APLNR与JAK1相互作用，调节肿瘤内的IFN-γ应答，在小鼠模型中，其功能缺失削弱过继性细胞和检查点阻断剂免疫治疗的疗效。

CRISPR-Cas9基因工程黑色素瘤免疫治疗 T细胞效应器功能 Gregory F Sonnenberg

BRAF突变

BRAF3型突变的肿瘤对RAS阻断剂敏感

① 活化的BRAF突变反馈抑制GTP结合的RAS，不依赖于RAS，信号作为活化的单体（1型）或结构性活化的二聚体（2型）；② BRAF3型突变，干扰激酶活性或为激酶失活，对ERK介导的反馈敏感，其信号传导的活化依赖于RAS；③ 突变者与RAS–GTP的结合更紧密，与野生型CRAF的结合增强并促进其活化，导致ERK信号传导通路增强；④ 携带BRAF3型突变的黑色素瘤亦携带RAS突变或NF1缺失，而肺癌和结直肠癌通常由受体酪氨酸激酶信号激活RAS；⑤ 通过不同机制激活ERK。

BRAF突变 RAS基因黑色素瘤

黑色素瘤

BTLA调控CTL细胞命运的分子机制

① 单细胞分析、反相蛋白分析、抗原特异性免疫模型、患者来源异种移植瘤模型，以自体肿瘤浸润性淋巴细胞（TIL）处理；② CD8+BTLA- TIL在体内不能控制肿瘤的生长，CD8+BTLA+ TIL及抗原特异性CD8+BTLA- T细胞疫苗应答缺陷；③ 杀伤肿瘤靶点及提高“连环杀伤”力之后，CD8+BTLA+ TIL改善生存；④ 通过提高IL-2分泌、TCR刺激后活化Src，Grb2介导共刺激功能；⑤ BTLA单一分子提供共刺激和共抑制信号，激活CD8+T细胞，延长生存期，发挥功能性回忆应答。

黑色素瘤肿瘤浸润淋巴细胞 B和T淋巴细胞弱化因子 T细胞生存肿瘤控制

肾移植受者

接受肾移植的患者，患黑色素瘤的风险升高

① 肾移植受者的黑素瘤风险因素和发病率可以为患者和临床医师做出决策；② 接受肾移植的105174例患者中，488例有移植后黑色素瘤记录；③ 影响是否发展黑色素瘤的重要危险因素包括：受者和供体年龄较大、男性、受者和供体为白种人、低于4个HLA不匹配、活体供体和西罗莫司和环孢素治疗；④ 显著影响存活的危险因素包括：年龄较大的受者、男性受者、白种人受者、活体供体和西罗莫司和环孢素治疗；⑤ 肾移植受者发生黑素瘤的风险高于一般人群。

肾移植受者黑色素瘤风险因素

黑色素瘤

体外扩增肿瘤特异性T细胞的活性：预测恶性黑色素瘤的预后

① 在荷载黑色素瘤肿瘤抗原的浆细胞样树突状细胞（pDCs）的基础上建立一种方法，可引起高效的抗肿瘤T细胞应答；② 采用该方法研究黑色素瘤患者外周血单核细胞和肿瘤浸润淋巴细胞的抗肿瘤T细胞功能；③ 根据疾病分期不同，pDCs引起不同比例的肿瘤特异性T细胞，表现出不同的功能特征，但与诊断时的组织学参数无关；④ pDCs驱动的MelA特异性T细胞的活性，可预测疾病复发时间和总体生存期；⑤ 肿瘤特异性T细胞的结构性活化可预测临床进展的重要特征。

黑色素瘤肿瘤特异性T细胞活性预后因素临床进展

IL-2复合物

肿瘤免疫治疗耐药：EZH2也掺和了一腿！

① 抗CTLA-4或 IL-2免疫治疗过程中，肿瘤内坏死因子-α（TNF-α）的产生和T细胞聚集导致黑色素瘤细胞中组蛋白甲基转移酶Ezh2表达增加，反过来沉默其自身的免疫原性和抗原提呈；② Ezh2失活逆转该耐药，与抗CTLA-4或 IL-2免疫治疗协同抑制黑色素瘤生长；③ 该抗肿瘤作用依赖于肿瘤内聚集的产生干扰素-γ（（IFN-γ）的PD-1（低）CD8+ T细胞和黑色素瘤细胞上PD-L1表达的下调；④ Ezh2是在靶向T细胞免疫治疗过程中调控黑色素瘤免疫逃逸的开关。

IL-2复合物抗CTLA-4 抗PD-1 表观遗传学免疫治疗

溶瘤病毒

间充质干细胞+溶瘤病毒=抗癌利器？

① 颈内动脉注射患者来源黑色素瘤和脑亲和性黑色素瘤细胞株，建立可体内成像小鼠模型，以及同基因脑转移小鼠模型；② 实时体内成像技术，脑内广泛分布镜下和肉眼转移灶，再现患者多灶性转移；③ 用不同的溶瘤单纯疱疹病毒（oHSV）异构体武装间质干细胞（MSCs）（MSC-oHSV），颅内MSC-oHSV可有效地示踪转移灶，延长脑转移小鼠的生存期；④ 在同基因模型中，联合MSC-oHSV和PD-L1阻断剂，促进产生IFNγ的CD8+肿瘤浸润T淋巴细胞，延长中位生存期。

溶瘤病毒干细胞黑色素瘤体内成像 imaging

黑色素瘤

CRISPR技术筛选肿瘤免疫新靶点：PTPN2，值得一看？

① PD-1检查点阻断的免疫治疗在少数癌症患者中有效；② 检测黑色素瘤中2368个基因的表达，鉴定哪些基因协同检查点阻断，哪些抵抗检查点阻断；③ 重新找到已知的免疫逃逸分子PD-L1和CD47，并证实干扰素-β信号传导缺失导对免疫治疗的抵抗；④ 多种不同途径的基因缺失导致肿瘤对免疫治疗敏感，包括NF-κB信号、抗原提呈和未折叠蛋白应答；⑤ 肿瘤细胞中蛋白酪氨酸磷酸酶PTPN2缺失，通过增强干扰素-γ介导的抗原提呈和生长抑制增加免疫治疗的功效。

黑色素瘤免疫治疗检查点阻断蛋白酪氨酸磷酸酶PTPN2

黑色素瘤

溶瘤病毒联合CTLA-4抗体：临床试验成功！

① 第7届芝加哥黑色素瘤/皮肤癌欧洲会后会，单纯疱疹病毒1为基础的溶瘤病毒T-VEC联合伊匹单抗治疗不可手术IIIb或IV期黑色素瘤的II期开放性临床研究；② 198例不可手术IIIb到IV期、有可测量/可注射病灶的黑色素瘤患者，1：1随机接受T-VEC联合伊匹单抗或伊匹单抗单药，中位随访时间分别为68周和58周；③ 联合组ORR翻倍，分别为38.7%和18%，OR 2.9，更多CR和PR，疾病控制率更高，所有亚组分析均提示ORR改善，PFS改善不明显；④ 无非预期不良事件。

黑色素瘤免疫治疗 CTLA-4抑制剂 PD-1抑制剂预后

黑色素瘤

基于neoantigen的多肽疫苗：初显疗效

① 全外显子组测序配对肿瘤和正常细胞DNA，鉴定体细胞突变，RNA测序分析突变等位基因的表达，预测与患者的自体HLA-A或HLA-B结合的突变肽；② 合成长肽靶向至少20个新抗原，混合Toll样受体3和黑色素瘤分化相关蛋白5激动剂聚-ICLC制备靶向个体化新抗原的疫苗；③ 入组10例患者，获得97个独特的新抗原，疫苗诱导的多功能性CD4+和CD8+ T细胞分别靶向58个和15个新抗原；④ 6例接种，4例完全缓解持续25个月，2例复发后进行抗PD-1治疗，达到完全缓解。

黑色素瘤全外显子组测序新抗原 Neoantigen RNA测序肿瘤免疫治疗

黑色素瘤

基于neoantigen的RNA疫苗：初显疗效

① 指向突变新表位的T细胞驱动肿瘤免疫，引进个体化突变组疫苗概念，实施RNA基础上的聚-新-表位方法以动员抗肿瘤突变免疫；② 建立流程，包括全面鉴定个体化突变，计算机预测新表位，为每位患者设计和制备独特的疫苗，所有患者均对多个疫苗新表位产生T细胞应答；③ 13例黑色素瘤患者，疫苗接种后转移的累计发生率明显下降，无进展生存期明显延长；④ 可利用个体化突变，开启肿瘤患者个体化免疫治疗的新篇章。

黑色素瘤肿瘤免疫治疗突变组聚-新-表位

黑色素瘤

达拉菲尼治疗BRAF突变的、伴脑转移的恶性黑色素瘤

① 第7届芝加哥黑色素瘤/皮肤癌欧洲会后会，2014年至2017年30例BRAF突变脑转移黑色素瘤患者接受达拉菲尼治疗的回顾性研究，33% ECOG PS 2分，57%基线时LDH升高，70%存在2个以上脑转移灶；② 4例（13%）完全缓解，9例（30%）部分缓解，12例（40%）疾病稳定，中位随访14个月，中位无进展生存期5.5个月，中位总体生存期8.8个月；③ ECOG PS评分差及颅外转移器官大于2个疾病进展风险高，HR为4.06和3.4；④ 真实世界中，达拉菲尼治疗脑转移有效。

黑色素瘤 BRAF突变达拉菲尼脑转移预后

黑色素瘤

PD-1抑制剂，用于恶性黑色素瘤的辅助治疗

① 根据Paul Lorigan在芝加哥黑色素瘤/皮肤癌欧洲会后会的报道，术后复发风险高的黑色素瘤患者，抑制PD-1辅助治疗可能成为新的标准治疗；② PD-1抑制剂辅助治疗的挑战在于，对照组、患者、研究终点的的选择，非预期毒性，治疗持续周期，辅助或挽救治疗的时机选择；③ 正在进行4项辅助治疗的III期研究，SWOG S1404，CheckMate 238和915，KEYNOTE-054；④ Decision DX基因表达分析检测面板，是预后性的，将更多地采用循环肿瘤DNA进行分子检测。

黑色素瘤辅助治疗 PD-1抑制剂 NRAS突变 BRAF突变

肝素结合因子midkine

midkine：肿瘤转移的先遣队

① 由人肿瘤细胞、临床活检标本或内源性失调的癌基因通路制备基因工程VEGFR3记者小鼠黑色素瘤转移灶的全身成像模型；② 早期诱导远处转移前生态位，不伴随原发灶的淋巴血管形成；③ 分析黑色素瘤的分泌蛋白质组，对临床样本进行验证，肝素结合因子midkine 是新淋巴血管形成的系统性诱导因素，致疾病进展；④ midkine 的作用与淋巴管内皮细胞mTOR 通路的旁分泌激活相关；⑤ 支持VEGFR3记者小鼠作为转移驱动因子和抑制因子的“MetAlert” 发现平台。

肝素结合因子midkine 黑色素瘤基因工程小鼠模型 mTOR 通路淋巴血管形成

黑色素瘤

恶性黑色素瘤转移的关键：FUT8

① 对患者原发灶及配对转移灶标本采用系统性方法，研究糖组学变化及黑色素瘤转移相关酶；② 核心岩藻糖基化（FUT8）的上调和α-1,2岩藻糖基化（FUT1、FUT2）的下调，是转移性黑色素瘤的特征；③ 体内外研究显示，FUT8是黑色素瘤转移的驱动因子，当被沉默后，抑制侵袭和肿瘤播散，FUT8糖蛋白靶点富含细胞游走蛋白，包括粘附分子L1CAM，核心岩藻糖基化影响L1CAM裂解和支持黑色素瘤侵袭性的能力；④ FUT8及其靶点是黑色素瘤转移的治疗靶点。

黑色素瘤糖基化 α-1 2岩藻糖基化粘附分子L1CAM

前哨淋巴结转移

恶性黑色素瘤手术：前哨淋巴结，要不要切

① 标准病理学方法或多个标志物分子分析方法检测的前哨淋巴结转移黑色素瘤患者，随机分组接受即刻完全淋巴结切除（切除组）或采用超声进行观察（观察组）；② 1934例患者纳入意向性分析人群，1755例患者纳入全分析集，即刻完全淋巴结切除未改善黑色素瘤特异性生存期；③ 切除组3年无病生存率略高，区域淋巴结3年控制率增高，切除组，11.5%患者出现非前哨淋巴结转移，是复发的独立预后因素；④ 切除组24.1%患者、观察组6.3%患者出现淋巴水肿。

前哨淋巴结转移黑色素瘤无病生存率淋巴水肿

罕见细胞变异

罕见细胞变异导致药物耐药：Nature重磅发现

① 耐药可源自继发性突变，但某些实例中，不存在明确的遗传学原因，提示非遗传学罕见细胞变异的可能性；② 黑色素瘤细胞在单细胞水平呈现严重的转录变异，最终耐药，这种变异包括很小比例细胞内多种耐药因子的高水平的少见、半协调转录；③ 药物诱导细胞出现表观遗传学重组，将一过性转录状态状态转变为稳定耐药状态；④ 这类重组始于SOX10介导的分化缺失，随后激活新的信号传导通路，部分由转录因子JUN和/或AP-1和TEAD的活化介导。

罕见细胞变异继发性突变耐药表观遗传学黑色素瘤

黑色素瘤

PD-1抗体治疗恶性黑色素瘤：动态监测

① 研究招募107名接受派姆单抗治疗的黑色素瘤晚期患者；② 在基线时，107例患者中有96例患者具有可测量的肿瘤负荷，11例单独具有非靶病变；③ 通过治疗，57例患者的肿瘤负荷仍然比基线增加＜20%；肿瘤负荷增加＜20%的患者的OS比增加＞20%的患者的长；④ 治疗期间<20％肿瘤负荷增加的患者的死亡危险显著降低；⑤ 4例患者出现假性进展，3例患者靶病变增加，1例没有测量疾病的患者发展新的病变，随后又恢复。

黑色素瘤派姆单抗（pembrolizumab）肿瘤负荷死亡危险病变

Atezolizumab单抗

PD-L1抗体+MEK抑制剂用于恶性黑色素瘤：疾病控制率75.0%

① Atezolizumab （A）是抗程序性死亡配体1 （PD-L1）单克隆抗体，抑制PD-L1/程序性死亡-1 （PD-1）结合，cobimetinib （C）促进肿瘤内T细胞浸润，上调主要组织相容性复合性1和通过靶向抑制MEK 而促进PD-L1表达；② 口服C，剂量递增20 mg→40 mg→60 mg，qd，持续21天，休息7天，静脉输注A，800 mg，每2周一次；③ 截止2016年10月12日，22例黑色素瘤可进行安全性评估，90.9%腹泻，68.2%皮疹，治疗相关3-4度AEs为54.5%，DCR 75.0%，mPFS 12.0个月。

Atezolizumab单抗 cobimetinib 分子黑色素瘤 PD-L1配体

细胞免疫治疗

PD-1抗体等治疗失败的恶性黑色素瘤患者：试一试TIL疗法

① 截止2017年1月31日，9例黑色素瘤患者接受TIL过继性细胞治疗（二期临床实验）；② 超过3例出现低磷酸盐血症（3-4级），无＞3级神经毒性，目前未出现因细胞免疫治疗引起的SAE致死或被迫停药；③ ORR为33%（CR = 11%，PR = 22%，SD = 22%，PD = 33%，NE = 11%）；④ 平均最佳反应时间为3个月，输入细胞14天后，所有患者体内TIL依然保留；⑤ 对于晚期转移性且PD1抗体耐受的黑色素瘤患者，TIL细胞治疗是一种可接受的安全治疗方案。

细胞免疫治疗肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）黑色素瘤 PD1抗体抗肿瘤

黑色素瘤

BRAF融合：威罗替尼耐药新机制

① BRAF抑制剂对BRAF V600E突变黑色素瘤疗效迅速，但许多患者会产生耐药性，本研究对该耐药机制进行研究；② AGAP3-BRAF融合基因的表达诱导黑色素瘤细胞对Vemurafenib（V）耐药，但对MEK抑制剂较敏感；③ BRAF和MEK抑制剂联用后患者临床获益，中断后一时间点活检显示融合基因无表达；④ BRAF抑制剂对BRAF V600E突变和表达AGAP3-BRAF融合基因的亲本黑色素瘤细胞只有适当疗效；⑤ 表达BRAF融合使BRAF V600E突变黑色素瘤对V产生耐药性的新的机制。

黑色素瘤 BRAF V600E突变 AGAP3-BRAF融合基因 BRAF抑制剂 MEK抑制剂